Pipeta graduada

Tiempo de lectura estimado: 10 minutos

Una pipeta graduada es una pipeta con su volumen, en incrementos, marcado a lo largo del tubo. Se utiliza para medir y transferir con precisión un volumen de líquido de un recipiente a otro. A lo largo del cuerpo del tubo hay marcas de graduación que indican el volumen desde la punta hasta ese punto.

Una pipeta pequeña permite una medición más precisa de los fluidos; una pipeta más grande puede utilizarse para medir volúmenes cuando la precisión de la medición es menos crítica. En consecuencia, las pipetas varían en volumen, y la mayoría miden entre 0 y 25,0 mililitros.

Tipos de pipetas graduadas

Pipetas Mohr y Serológicas

Existen dos tipos de pipetas que se diferencian por la ubicación de las marcas con respecto a la punta de la pipeta. Se trata de las pipetas Mohr y las pipetas serológicas, y sólo se diferencian por la posición de la primera marca de graduación, la más cercana a la punta de la pipeta.

Una pipeta Mohr está diseñada para su uso como pipeta de drenaje. Tiene un tubo recto y marcas de graduación que indican cambios de volumen de 0,10 mililitros. Este tipo de pipeta no tiene su primera marca de graduación (la más baja) hasta bien pasada la base de la punta. Puede producirse un error debido a un uso inadecuado por parte de la persona que utiliza la pipeta o si hay una rotura o grieta en la pipeta.

La diferencia entre la marca de calibración de la pipeta Serological (arriba) y la Mohr (abajo)
La diferencia entre la marca de calibración de la pipeta Serological (arriba) y la Mohr (abajo)

Una pipeta serológica está diseñada para su uso como pipeta de soplado. Una pipeta serológica también tiene marcas de graduación, que comienzan cerca del extremo de la punta. La pipeta puede ser vaciada por la fuerza gravitacional o por la presión del aire. Para «soplar» la solución restante se suelen utilizar unas peras de goma fijadas en el extremo opuesto a la punta. El hecho de que la solución permanezca en la pipeta puede afectar un experimento al permitir una discrepancia entre lo que se mide y lo que se transfiere. La designación de si la pipeta es «para entregar» (TD) o «para contener» (TC) está marcada en la mayoría de las pipetas serológicas.


Pipetas graduadas tipos 1, 2 y 3

Las pipetas graduadas se clasifican en tres tipos: Tipo 1, Tipo 2 y Tipo 3. Las pipetas de Tipo 1 y Tipo 3 tienen el valor nominal en la parte inferior (cero en la parte superior). Para el tipo 1, la solución se suministra parcialmente para todos los volúmenes. Para el tipo 3, la solución se suministra totalmente sólo en el valor nominal. Las pipetas de tipo 2 tienen el valor nominal en la parte superior (Cero en la parte inferior) y la solución se suministra totalmente para cualquier volumen.

Historia

Una pipeta funciona creando un vacío parcial por encima de la cámara que contiene el líquido, para aspirar el líquido, y liberando el vacío parcial para entregar el líquido.

Históricamente, la precisión de una pipeta graduada no era tan buena como la de una pipeta volumétrica (precisión de 3 cifras significativas); sin embargo, con la mejora de los métodos de fabricación, la precisión indicada por el fabricante puede igualar la de una pipeta volumétrica. Las pipetas graduadas se consideran más precisas que la pipeta Pasteur. Tienen tolerancias que van de ±0,6% a ±0,4% del volumen nominal cuando se miden a 20 °C (68 °F).


Las pipetas graduadas se fabrican de acuerdo con las especificaciones ISO en cuanto a la precisión y la disposición de las graduaciones. Las pipetas de grado A y AS tienen la mayor precisión, la S significa «entrega rápida». Estos rangos de error permitidos son idénticos a los de las normas DIN EN ISO. Las pipetas de grado B suelen tener el doble de error permitido que las pipetas de grado A y AS.

Estas pipetas suelen venir en volúmenes de 5, 10, 25 y 50 mL. Se ha desarrollado una variedad de propipetadores, tanto totalmente manuales como asistidos eléctricamente. Originalmente las pipetas eran de vidrio sodocálcico, pero actualmente muchas son de vidrio borosilicato; las pipetas graduadas desechables suelen ser de poliestireno.

Normas específicas para pipetas de vidrio

La clasificación estándar de las pipetas graduadas es según la forma, las puntas de suministro, las líneas de graduación, los periodos de llenado y descarga y la calibración.


Clasificación estándar Las pipetas graduadas de vidrio más precisas se clasifican según el género, la clase y la dimensión. Los dos géneros, Género 1 y Género 2, denotan, respectivamente, pipetas con «punta cónica estándar» y «punta cónica larga».

Las dos clases son Clase A y Clase B. Las pipetas de Clase A se fabrican con tolerancias precisas, o «límites de error». A las de clase B se les permite el doble de límites de error que a las de clase A. La especificación de clase o el número de serie de las de clase B no están marcados.

Diseño estándar Las puntas de suministro cónicas del género 1 y del género 2 son diferentes: para el género 1, la punta tiene una longitud de entre 15 y 30 mm, para una pipeta de 5 ml de capacidad, y de entre 20 y 40 mm, para capacidades de 10 a 50 ml; para el género 2, la punta es más larga, de entre 50 y 65 mm de longitud. La abertura en el extremo de la punta es perpendicular al eje del tubo, y una abertura inesperadamente estrecha no es aceptable para las pipetas genero 2. El biselado y el pulido a fuego del margen externo de la abertura de la punta son esenciales.


Se especifica el tiempo permitido para el llenado y la descarga, desde la primera hasta la última marca. Dichos tiempos se miden con un cronómetro y utilizando agua destilada a 20 °C.

Por lo general, se exige que la escala de capacidad tenga marcas de no menos de 90 mm, con la excepción de que las pipetas de 0,5 ml tengan no menos de 80 mm. La norma para todas las pipetas es que las marcas sean indelebles y comprensibles, grabando las marcas y utilizando tinta permanente o de esmalte. Se exige que cada marca de graduación no se desvíe más de 0,40 mm de la verdadera, y que sea perpendicular al eje del tubo.

Clasificación de exactitud y precisión

Clase A: Los límites de error de esta clase de equipos volumétricos de vidrio se especifican en la norma DIN EN ISO 9712, que se aplica tanto a la propia clase A como a otras clases que tienen una designación similar, como la clase AS.


Dos clases de precisión en pipetas graduadas. Clase AS y Clase B
Dos clases de precisión en pipetas graduadas. Clase AS y Clase B

Clase AS: Especifica una pipeta de entrega «rápida», facilitada por el hecho de que la pipeta tiene una punta expandida. La marca de clase se encuentra cerca de la especificación del volumen.

Clase B: La diferencia entre la clase A/AS y la clase B es que los límites de error para la clase B son el doble de los permitidos para las clases A y AS, las pipetas de la clase B pueden ser de plástico y no se especifica el tiempo de espera del sistema de entrega (TD, Ex).

Tiempos de descarga y de espera

Los tiempos de entrega y de espera representan la eficiencia del fluido que se entrega como TD y EX. La marca de TD («To delivery – para entregar»), o EX, significa que el volumen especificado es la cantidad de solución que saldrá de la pipeta, que podría ser menor que la cantidad total presente debido al fluido remanente que se adhiere a la pared del equipo. El tiempo de entrega se describe como la duración del tiempo en que el menisco alcanza el extremo de la punta a partir del volumen más alto, que se especifica como 5 segundos para los equipos volumétricos de bulbo de clase AS y de pipeta graduada. Las pipetas TD/EX son el tipo más común.


Los tiempos de entrega y espera se representan como con la abreviatura "TD"
Los tiempos de entrega y espera se representan como con la abreviatura «TD»

Otro tipo se identifica como TC («to contain – para contener»), o IN, lo que significa que el volumen especificado es la cantidad real de solución presente en la pipeta, y por lo tanto es esencial soplar todo para obtener esa cantidad en el recipiente secundario.

Menos comúnmente, algunas pipetas TD están hechas «para contener» según el fabricante y hechas para ser sopladas. Un conjunto de dos anillos impresos en el extremo superior de la pipeta indica que es del tipo «soplado» y que debe ser soplada usando una pera de goma. No sople la solución si la pipeta no tiene anillos en el extremo superior.

Técnica de uso y recomendaciones

Se recomienda utilizar una pipeta cuyo tamaño sea el más cercano al volumen con el que se trabaja. Es necesario enjuagar la pipeta antes de utilizarla para evitar errores.


Las pocas gotas que quedan debido a la adherencia son la diferencia de volumen entre la cantidad contenida y la cantidad entregada. Las pipetas pueden calibrarse para tener en cuenta este volumen previsto o bien para que este líquido sea soplado y transferido también.

La técnica estándar para manipular una pipeta graduada consiste en mantener la punta de la pipeta sumergida en la solución sin tocar el fondo del vaso. A continuación, utilice un propipetador, una pera de pipeta o una pera de goma para introducir el líquido en la pipeta. La forma más eficaz de controlar el volumen de la solución es utilizar el dedo índice. Después de obtener el volumen deseado, se puede liberar la solución en otro recipiente levantando el dedo. Durante el pipeteado, la pipeta no debe mantenerse más que en posición vertical.

La solución formará un menisco, cuya posición se lee según la escala impresa en la pipeta. Para los líquidos de alta viscosidad, el volumen se mide mirando el menisco superior. Para los líquidos de baja viscosidad, el volumen se mide mirando el menisco inferior.


Para realizar la dispensación de un líquido con una pipeta graduada, se llena la pipeta hasta su capacidad marcada y se dispensa el líquido en las diferentes cantidades dentro del rango de graduaciones. El líquido que queda por debajo de la graduación inferior de la pipeta no debe ser dispensada. La figura 1 muestra dos formas de utilizar una pipeta graduada de 10 mL para medir 3,2 mL de líquido. El dibujo de la izquierda ilustra que la pipeta se vacía hasta la graduación inferior y no más. Si el líquido por debajo de la graduación más baja se vacía en el recipiente receptor, la cantidad entregada será excesiva. El dibujo de la derecha muestra cómo llenar la pipeta hasta la marca cero y dispensar los 3,2 mL de líquido desde ese punto utilizando las graduaciones.

Figura 1. Dispensación de 3,2 mL de una pipeta Mohr
Figura 1. Dispensación de 3,2 mL de una pipeta Mohr

Para más información Use of Pipets

Print Friendly, PDF & Email
A %d blogueros les gusta esto: