Extracciones a microescala

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El trabajo a microescala implica la manipulación de menos de 300 mg de compuesto, y suele implicar volúmenes de disolvente de 5 mL o menos. Un embudo de separación sería poco práctico cuando se trabaja con cantidades tan pequeñas, y en su lugar se suelen utilizar viales cónicos (Figura 1) o tubos de centrífuga.

Figura 1: Progreso de la extracción del rojo de metilo de la capa acuosa ácida (abajo) a la capa orgánica (arriba). Las inversiones se hicieron muy lentamente para ver las extracciones por etapas. Incluso con una mezcla suave, el rojo de metilo (y por tanto el color) se extrae rápidamente.
Figura 1: Progreso de la extracción del rojo de metilo de la capa acuosa ácida (abajo) a la capa orgánica (arriba). Las inversiones se hicieron muy lentamente para ver las extracciones por etapas. Incluso con una mezcla suave, el rojo de metilo (y por tanto el color) se extrae rápidamente.

Las imágenes de esta sección muestran la extracción a microescala de 2mL de una solución acuosa ligeramente ácida que contiene una sola gota de solución de rojo de metilo en 2mL de acetato de etilo. El color (rojo de metilo), se extrae de la capa acuosa (abajo) a la capa de acetato de etilo (arriba).

Figura 2: a) Añadiendo disolvente al vial cónico mediante una pipeta, y utilizando un vaso de precipitados para apoyar el vial, b) Apoyando el vial con un anillo de corcho, c+d) Colocando el tapón forrado de teflón en el vial, e) Mezclando manualmente las capas (utilizando un sistema diferente).
Figura 2: a) Añadiendo disolvente al vial cónico mediante una pipeta, y utilizando un vaso de precipitados para apoyar el vial, b) Apoyando el vial con un anillo de corcho, c+d) Colocando el tapón forrado de teflón en el vial, e) Mezclando manualmente las capas (utilizando un sistema diferente). un sistema diferente).

Mezclar las soluciones (para la extracción a microescala)

  1. Vierta el contenido a extraer en un vial cónico, o en un tubo de vidrio con un extremo cónico (por ejemplo, un tubo de centrífuga). Como estos recipientes son propensos a volcarse, utilice un vaso de precipitados (Figura 2a) o un anillo de corcho invertido (Figura 2b) como soporte.
  2. Añada el disolvente extractor con una pipeta (Figura 2a). Si se utiliza un vial cónico, las marcas de volumen en el vidrio pueden ser útiles.
  3. Mezcle suavemente las dos soluciones utilizando uno de los siguientes métodos:
    • Asegure un tapón firmemente en el vial (Figura 2c+d) y luego invierta y agite el tubo durante 10-20 segundos (Figura 1). Los viales cónicos y los tubos de centrífuga tienden a ser menos herméticos que los embudos de separación, por lo que no debería ser necesario ventilar el sistema durante la agitación a menos que se utilicen soluciones de NaHCO3 o Na2CO3
  • Otra posibilidad es mezclar manualmente las capas con una pipeta. Retire una pipeta llena de la capa inferior del vial y luego expulse vigorosamente la solución a través de la capa superior (Figura 2e). Haga esto repetidamente durante al menos un minuto. No se recomienda la mezcla manual cuando se utilizan disolventes de bajo punto de ebullición (por ejemplo, éter dietílico), ya que el volumen suele disminuir drásticamente después de la mezcla. En su lugar, utilice el primer método de mezcla descrito.
Figura 3: a+b) Extracción de la capa inferior, con pipeta en la punta del vial, c) Extracción de una gota residual de la capa inferior dejando que las capas se separen dentro de una pipeta Pasteur, d) Capas separadas.
Figura 3: a+b) Extracción de la capa inferior, con pipeta en la punta del vial, c) Extracción de una gota residual de la capa inferior dejando que las capas se separen dentro de una pipeta Pasteur, d) Capas separadas.

Separar las capas (para la extracción a microescala)

  1. Separe las capas con una pipeta Pasteur. El diseño de los viales cónicos y de los tubos de centrífuga permite separar eficazmente las capas mediante la retirada de la capa inferior con una pipeta. Esto significa que, aunque se quiera reservar la capa superior, es necesario retirar primero la capa inferior.
    • Sostenga el vial cónico o el tubo cónico en la misma mano como recipiente para la capa inferior (etiquételo). Retire la mayor parte de la capa inferior con la pipeta Pasteur y dispénsela en el recipiente (Figura 3a).
    • Al retirar, coloque siempre la punta de la pipeta en la punta del vial cónico o del tubo cónico (Figura 3b).
    • Puede ser difícil retirar la última gota de la capa inferior de la punta del vial. Para ello, retire la totalidad de la capa inferior y una pequeña cantidad de la capa superior en la pipeta. Deje que las capas se separen dentro de la pipeta (Figura 3c), y luego expulse delicadamente la capa inferior de la pipeta al recipiente. Devuelva el resto de la capa superior al vial cónico.
  1. Si la capa inferior es la capa deseada, y hay que hacer otra extracción, añadir disolvente orgánico fresco a la capa superior que aún está en el vial cónico y repetir la extracción y la separación.
  1. Si la capa superior es la capa deseada, retírela del vial cónico utilizando una pipeta nueva en un recipiente limpio. Si se va a realizar otra extracción, devuelva la capa inferior al vial cónico, añada disolvente fresco y repita la extracción y la separación.

Para más información Microscale Laboratory Techniques – Extractions

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